کیت استخراج DNA ژنومی از نمونه های مختلف

ژن قسمتی از مولکول DNA است که حامل اطلاعات ژنتیکی است  که از والدین به نسل بعد انتقال می‌دهد و باعث بروز صفاتی مشابه والدین در فرزندان می‌‌شود. ژن‌ها حاوی کدهای نوکلئوتیدی هستند که می‌توانند اطلاعات ساخت و تولید RNA  و پروتئین‌های مختلف را در اختیار سایر ابزارهای سلولی قرار دهند. برای این کار ابتدا توسط آنزیم‌های سلولی، ژن‌ها رونویسی شده و ‌RNA‌های عملکردی را می‌سازند و یا mRNAهایی برای ترجمه به پروتئین تولید می‌کنند.

ژن‌های انسانی

ژنوم موجودات زنده در ارگانیسم های خاص و سخت ، پیچیده تر است و نیز تعداد ژن‌های آن نیز بیشتر می باشد . براساس مطالعات انجام شده در پروژه ژنوم انسانی ، بر اساس تخمین ثبت شده ، حدود 30،000 ژن انسانی، کدهایی مربوط به پروتئین‌هایی را ایجاد می‌کنند که هویت ویژه ی آناتومی و فیزیولوژی هر فرد را می‌سازند.

در ژنوم انسانی حدود سه میلیارد جفت باز ثبت شده است که این بازها قسمتی از مونومرهای نوکلئوتیدی تشکیل دهنده اسیدهای نوکلئیکی را می سازند . ترتیب و نحوه قرارگیری این جفت بازها کدهای مربوط به ژن‌ها را تشکیل می‌دهند و این ژن‌ها با استفاده از جفت‌ بازها، اطلاعات قابل انتقال برای تولید پروتئین‌ها را فراهم می‌کنند.

با توجه به مبحث کیت استخراج DNA ، لازم است در ابتدا به بررسی اجزای اصلی خون که رایج ترین نمونه ی مورد استفاده در پروسه استخراج اسیدنوکلئیک می باشد ، بپردازیم.

قسمت های اصلی خون

خون طی فرایند سانتریفیوژ ، ترکیبات اصلی آن مانند شکل زیر به سه قسمت اصلی نمایان می شود:

پلاسما

مهمترین بخش پلاسما خون است که حاوی گلبول های قرمز ،  گلبول های سفید و پلاکت ها و دیگر مواد حیاتی در خون است و حدود 55 درصد از حجم خون را در بر می گیرد .قسمت عمده از حجم پلاسما را آب تشکیل می دهد .  پلاسما خون علاوه بر  ترکیبات ذکر شده ، شامل نمک ، پروتئین ها  و دیگر اجزا نیز هست که دلیل ساختار غلیظ آن  می باشد . یکی از پروتئین های موجود در پلاسما آلبومین هست که در صورت جراحت بدن ، شدت خونریزی را کنترل می کند .

همچنین در زیر مروری بر دیگر ترکیبات پلاسما داریم :

1. هورمون‌ها که در واقع بعنوان پیام‌های شیمیایی بیان می شوند که به بافت های مختلف بدن ارسال می‌شوند.
2. آنتی بادی‌ها که ترکیبات پروتئینی هستند و مسئول حمله به پاتوژن‌های مهاجم هستند .
3. الکترولیت‌ها کهترکیباتی از انواع متفاوت نمک‌ هستند که بسیار در کنترل فشار اسمزی و تنظیم PH اهمیت دارند .
4. عوامل لخته کننده خون سلول‌هایی که شدت خونریزی را در هنگام جراحت کنترل می کنند .
5. مواد مغذی که شامل انواع قندها ، ویتامین‌ها و مواد معدنی هستند که به کلیه ی سلول های بدن ارسال می شوند .
6. لیپیدها که ترکیباتی چربی مانند از نوع کلسترول و تری گلیسیریدها هستند .

شرکت یکتا تجهیز آزما  جهت رفع نیاز پژوهشگران و محققان کشورمان ، با اخذ نمایندگی انحصاری از کمپانی Favorgen تایوان ، اقدام به واردات گسترده کیت استخراج DNA کرده است . کیت استخراج DNA  با توجه به نیاز کاربر در انواع متفاوت جهت انجام پروسه استخراج DNA از نمونه های مختلف همیشه در انبار شرکت موجود می باشد .

 گلبول‌های قرمز خون

نقش اصلی و حیاتی گلبول‌های قرمز خون منتقل کردن اکسیژن از ریه به خون و بازگرداندن دی اکسید کربن به ریه ها است  .  این سلول ها حاوی پروتئینی به نام هموگلوبین هستند که حامل اکسیژن هستند که در طی جریان خون ، اکسیژن را در بافت ها آزاد و دی اکسید کربن را جمع آوری می کنند . هموگلوبین خون در واقع نوعی رنگدانه محسوب می شود که با توجه به اتصال آن به اکسیژن تغییر رنگ می دهد . به همین جهت خون حامل اکسیژن قرمز روشن و خون حاوی دی اکسید کربن قرمز تیره است .

گلبول‌های سفید خون  و پلاکت ها

گلبولهای سفید جزء  سلول های سیستم ایمنی ( دفاعی ) بدن محسوب می شوند و ساخته شدن این سلول ها بوسیله ی سلول‌های بنیادی در مغز استخوان انجام می گیرد و انواع مختلفی دارند که بعضی از آن ها را به اختصار در زیر توضیح می دهیم :

1. نوتروفیل‌ها که نقش حمله به باکتری‌ها و قارچ‌های بیماری‌زا در بدن را دارند .
2. ائوزینوفیل‌ها که مسئول حمله به انگل های بیماری زا هستند . همچنین نقش مهمی در واکنش  های التهابی آلرژیک دارند .
3. بازوفیل‌ها که با آزاد کردن مواد شیمیایی منجر به تقویت واکنش های التهابی در بدن می شوند .
4. لنفوسیت‌های B که با آزاد کردن آنتی بادی ها منجر به فعال شدن لنفوسیت T می شوند .
5. لنفوسیت‌های T با شناسایی عفونت های جدید در بدن به سیستم دفاعی بدن کمک می کنند .
6. لنفوسیت‌های کشنده طبیعی مسئول منهدم کردن سلول‌های توموری و ویروس‌ها هستند .
7. مونوسیت که با مهاجرت به بافت ها در ماکروفاژها بالغ می شوند . در واقع ماکروفاژها باعث انهدام فاکتورهای مهاجمی می شوند .

محققان و پژوهشگران با توجه به نمونه های مورد بررسی می توانند کیت  استخراج DNA  مناسب را انتخاب کنند . به طورکلی  کیت استخراج DNA   در چند گروه متفاوت و پرکاربرد در  دسترس می باشد ولی پرکاربردترین  آن ها کیت استخراج DNA از خون و کیت استخراج DNA از بافت می باشد .

مراحل استخراج DNA با استفاده از ستون های مینی پرپ

فرایند استخراج  DNA با استفاده از ستون های مینی پرب  شامل سه مرحله است:

1. اتصال DNA به غشاء
2. حذف آلاینده های باقیمانده
3. شستشوی DNA ژنومی خالص

ستون های موجود در کیت استخراج DNA از ظرفیت اتصال بالایی برخوردار هستند و امکان خالص سازی DNA با کیفیت بالا را در گونه های مختلف فراهم میسازد.

در واقع استخراج DNA  به روش ستونی یک روش معمول برای جمع آوری DNA برای تجزیه و تحلیل مولکولی در آزمایشگاه های سراسر دنیا است . امروزه با یک نمونه خالص از DNA می توانید ادامه فرایند تحقیقات بیشتر مانند PCR ، توالی یک بیماری ژنتیکی ، تجزیه و تحلیل شواهد پزشکی قانونی یا مطالعه ی یک ژن درگیر در سرطان و… آزمایش کنید.

با استفاده از کیت استخراج DNA  از خون می توانید استخراج DNA  از نمونه های خون کامل ، سرم ، پلاسما ، مایعات بدن و بافی کوت را انجام دهید.

با استفاده از کیت استخراج DNA از بافت  نیز می توانید فرایند استخراج DNA از نمونه های سلول حیوانی ، بافت حیوانی ، خون ، باکتری های گرم مثبت و گرم منفی ، بافت پارافینه ، مخمر ، قارچ ، بزاق ، سواب ، شیر و اسپرم را انجام دهید .

همانطور که اشاره شد قسمت اصلی خون پلاسما است که 55 درصد از حجم خون را در بر میگیرد. خون کامل حاوی سه نوع سلول زیر است:

1. گلبولهای قرمز که با حروف اختصاری RBCs بیان می شوند . این سلول ها هیچ DNA ندارند زیرا هسته خود را در حین بلوغ از دست می دهند .
2. گلبولهای سفید که با حروف اختصاری WBCs بیان می شوند و حاوی DNA و ماده ژنتیکی هستند
3. پلاکت ها

نمونه خون با شوینده هایی که سلول را باز می کنند برای فرایند استخراج DNA  آماده میشود.سپس از آنزیم ها برای تجزیه پروتئین ها ، RNA ، قندها و چربی های موجود در آن استفاده می شود. کیت استخراج DNA  ژنومی به روش ستونی  برای استخراج سریع و خالص سازی DNA طراحی شده است .

روش استخراج DNA  از خون با حضور پروتئیناز کا صورت میگیرد و غشاهای بافتی و سلولی هضم شده و سپس روی ستون مینی پرب اعمال میشود. پس از اتصال اولیه DNA ، ناخالصی هایی مانند پروتئین ،پلی ساکاریدها ، متابولیت های کم وزن مولکولی و نمک ها با مراحل کوتاه شستشو از بین می روند و در نتیجه استخراج DNA با کیفیت بالا انجام می گیرد . در مرحله ی آخر DNA  استخراج شده برای نگهداری طولانی مدت در دمای 20- سانتی گراد حفاظت میشود.