ارتباط مستقیم با کارشناس فروش
طرز تهیه بافر TBE 10X
طرز تهیه بافر TBE 10X
B: Tris (تریس)، B: Boric acid (اسید بوریک)، E: EDTA (اتیلندیآمینتترااستیک اسید)
بافر TBE یکی از محلولهای استاندارد در آزمایشگاههای زیستشناسی مولکولی و ژنتیک است که بهویژه در الکتروفورز DNA و RNA استفاده میشود. نسخه 10X این بافر، غلظتی ده برابر محلول کاری (1X) دارد و معمولاً قبل از استفاده با رقیق کردن به 1X تبدیل
میشود.
مواد لازم برای تهیه TBE 10X
- Tris Base (تریس پایه): 108 گرم
- Boric Acid (اسید بوریک): 55 گرم
- EDTA (0.5 M, pH 8.0): 40 میلیلیتر
- آب مقطر: تا حجم نهایی 1 لیتر
نکته: EDTA بهتر است قبل از اضافه کردن به محلول، کاملاً با pH 8 تنظیم شده باشد.
مراحل تهیه بافر TBE 10X
- وزن کردن مواد خشک:
- 108 گرم Tris Base
- 55 گرم Boric Acid
- حل کردن مواد در آب مقطر:
- مواد خشک را در حدود 800 میلیلیتر آب مقطر بریزید و به آرامی هم بزنید تا کاملاً حل شوند.
- اضافه کردن EDTA:
- 40 میلیلیتر EDTA 0.5M با pH 8 را به محلول اضافه کنید.
- تنظیم حجم نهایی:
- حجم محلول را با آب مقطر به 1 لیتر برسانید.
- هم زدن و فیلتراسیون (اختیاری):
- محلول را تا کاملاً شفاف شدن هم بزنید.
- اگر نیاز دارید، میتوانید محلول را از فیلتر 0.22 میکرونی عبور دهید تا ذرات معلق حذف شوند.
- نگهداری:
- محلول 10X را در بطری شیشهای یا پلاستیکی مقاوم به دما نگهداری کنید.
- دمای اتاق یا یخچال مناسب است. در صورت استفاده طولانیمدت، دمای یخچال توصیه میشود.
بیشتر بخوانید : ” طرز تهیه بافر تریس HCL “
روش استفاده از TBE 10X
- برای استفاده در الکتروفورز، معمولاً بافر 10X را با نسبت 1 به 10 رقیق میکنند تا بافر 1X تهیه شود.
- بهعنوان مثال: برای 1 لیتر محلول کاری، 100 میلیلیتر TBE 10X را با 900 میلیلیتر آب مقطر ترکیب کنید.
مزایای استفاده از بافر TBE
- حفظ pH ثابت در طول الکتروفورز
- افزایش کیفیت جداسازی DNA و RNA
- جلوگیری از تخریب اسید نوکلئیکها
سوالات متداول درباره بافر TBE 10x
بافر TBE چیست و از چه اجزائی تشکیل شده است؟
TBE مخفف Tris-Borate-EDTA است؛ شامل Tris base، بوریک اسید و EDTA که DNA/RNA را محافظت میکند.
TBE برای چه کاربردهایی مناسب است؟
برای الکتروفورز DNA/RNA در ژل آگارز و پلیآکریلآمید، به خصوص جداسازی قطعات کوچک و دقیق.
چرا بعضی آزمایشها TBE را به جای TAE انتخاب میکنند؟
TBE ظرفیت بافری بالاتری دارد و pH را در طول الکتروفورز ثابت نگه میدارد، وضوح باندها بهتر است.
