آنزیم DNase I

آنزیم DNase I یک آنزیم دی‌ان‌آز است که به‌طور خاص مسئول تجزیه و هیدرولیز DNA است.

این آنزیم پیوندهای فسفودی‌استر بین نوکلئوتیدها در زنجیره‌های DNA را می‌شکند و آن‌ها را به قطعات کوچک‌تر تجزیه می‌کند.

DNase I در بسیاری از فرآیندهای بیولوژیکی نظیر تنظیم بیان ژن، تکثیر سلولی، و پاسخ ایمنی نقش دارد.

آنزیم dnase در پژوهش‌های مولکولی برای حذف DNA از نمونه‌ها استفاده می‌شود، به‌ویژه زمانی که می‌خواهند از آلودگی DNA در تجزیه و تحلیل‌های پروتئینی یا RNA جلوگیری کنند. DNase I به‌طور خاص در حضور یون‌های کلسیم (Ca²⁺) یا منیزیم (Mg²⁺) فعال می‌شود و در این شرایط به‌طور مؤثری می‌تواند DNA را تجزیه کند.

آنزیم DNase I یا دئوکسی ریبونوکلئاز ، یک اندونوکلئاز DNA است که با اتصال به اتصالات فسفودی استر ، DNA را برش می دهد و قطعات الیگو نوکلئوتیدی با گروه فسفات در انتهای ‘5 و گروه هیدروکسیل در انتهای ‘3 ایجاد می کند.

فعالیت این آنزیم به شدت به Ca²⁺ وابسته است و یون‌های فلزی دو ظرفیتی مانند Mg²⁺ یا Mn²⁺ می‌توانند آن را فعال کنند.

این آنزیم قادر به هضم DNA تک‌رشته‌ای و دو‌رشته‌ای است و معمولاً در کاربردهای زیست‌شناسی مولکولی مانند تیمار RNA مورد استفاده قرار می‌گیرد.

کاربرد:

حذف آلودگی DNA در استخراج RNA
حذف DNA از نمونه های پروتئین
در مواردی که حذف DNA ضروری است

سوالات متداول

آیا جهت استفاده از آنزیم DNase I جهت تیمار RNA ، به بافر این آنزیم نیاز داریم؟

چنانچه تیمار هنگام استخراج و در روش استخراج ستونی انجام بگیرد نیازی به بافر ندارید و بر اساس پروتوکل کیت مورد استفاده اقدام کنید، اما اگر تیمار بعد از استخراج RNA صورت بگیرد نیاز است تا از بافر مربوط به این انزیم استفاده کنید.