مسترمیکس PFU – راهکار حرفه‌ای برای PCR دقیق و سریع با آنزیم Pfu DNA Polymerase

مسترمیکس YTA-Pfu Master Mix یک ترکیب آماده و کامل برای انجام واکنش PCR است که شامل آنزیم قدرتمند و با دقت بالا Pfu DNA polymerase، بافر بهینه‌شده، مجموعه dNTPها و یون‌های Mg می‌باشد. این ترکیب تخصصی به گونه‌ای طراحی شده است که امکان تکثیر سریع، دقیق و با کیفیت بالا نمونه‌های DNA را به ساده‌ترین شکل ممکن برای کاربران فراهم می‌کند.

آنزیم Pfu DNA polymerase که از باکتری مقاوم به حرارت Pyrococcus furiosus استخراج شده، به دلیل مقاومت بالا در برابر دمای زیاد و همچنین دارا بودن فعالیت ذاتی اگزونوکلئاز ۳′→۵′ (ویراستاری)، قادر است خطاهای احتمالی در هنگام همانندسازی DNA را به میزان قابل توجهی کاهش دهد. این ویژگی منحصربه‌فرد باعث شده مسترمیکس PFU به گزینه‌ای ایده‌آل برای پروژه‌های حساس و کاربردهایی با نیاز به دقت بالا تبدیل شود.

ویژگی‌های کلیدی مسترمیکس PFU در PCR

دقت بسیار بالا: آنزیم Pfu در مقایسه با آنزیم Taq معمولی، معمولاً ۱۰ تا ۲۰ برابر خطاهای کمتری در حین تکثیر DNA ایجاد می‌کند. این دقت بالا برای پروژه‌هایی که صحت توالی DNA اهمیت حیاتی دارد، بسیار مهم است.
فعالیت ویراستاری (Proofreading): قابلیت اصلاح اشتباهات نوکلئوتیدی باعث افزایش کیفیت و صحت توالی‌های PCR شده و از بروز جهش‌های ناخواسته جلوگیری می‌کند.
کارایی سریع و بهینه: بافر اختصاصی و ترکیب کامل مواد واکنش، شرایط ایده‌آل برای واکنش‌های PCR با راندمان بالا و یکنواخت را فراهم می‌سازد.
سهولت استفاده: ترکیب مسترمیکس PFU آماده استفاده است و نیاز به ترکیب جداگانه مواد اولیه ندارد، بنابراین باعث صرفه‌جویی در زمان و کاهش خطاهای آزمایشگاهی می‌شود.

کاربردهای مختلف آنزیم Pfu در آزمایشگاه

تکثیر قطعات DNA با دقت بالا: مناسب برای تحقیقات ژنتیکی و آنالیزهای مولکولی
کلونینگ و ساخت پلاسمید: تولید محصولات دقیق و بدون خطا برای مراحل کلون‌سازی
جهش‌زایی هدفمند: کاربرد در اصلاح ژن‌ها و مهندسی ژنتیک
تعیین توالی DNA: تولید محصولات PCR مناسب برای توالی‌یابی دقیق DNA و RNA

برای مطالعه بیشتر درباره روش‌های مختلف PCR و انواع آنزیم‌های DNA polymerase، می‌توانید به سایت Thermo Fisher Scientific مراجعه کنید.

نکات مهم در استفاده از مسترمیکس PFU

تنظیم دقیق دما و زمان در چرخه‌های PCR به منظور رسیدن به بهترین نتایج
استفاده از پرایمرهای با کیفیت و طراحی دقیق برای افزایش کارایی واکنش
ذخیره‌سازی مناسب مسترمیکس PFU در دمای -۲۰ درجه سانتی‌گراد برای حفظ پایداری آنزیم

مسترمیکس PCR یا مسترمیکس سوپر PCR یا مسترمیکس Pfu ؟ کدام انتخاب مناسب تر است ؟

انتخاب نوع آنزیم پلیمراز برای واکنش PCR باید بر اساس هدف نهایی آزمایش تعیین شود. در صورتی‌ که هدف از PCR صرفاً تأیید حضور یک توالی خاص یا انجام آزمایش‌های تشخیصی باشد، استفاده از مستر میکس‌های معمولی حاوی Taq DNA polymerase به دلیل سرعت بالا، هزینه‌ کمتر و راندمان مناسب توصیه می‌شود. با این حال، برای کاربردهایی که در آن‌ها دقت توالی اهمیت حیاتی دارد ـ از جمله کلونینگ دقیق، طراحی سازه‌های نوترکیب، یا آماده‌سازی نمونه برای توالی‌یابی ـ استفاده از آنزیم‌های با fidelity بالا مانند Pfu DNA polymerase به دلیل دارا بودن فعالیت proofreading و نرخ خطای پایین‌تر توصیه می‌شود. در مجموع، تطابق نوع آنزیم با هدف آزمایش، نقش کلیدی در کیفیت و صحت نتایج PCR خواهد داشت.
مسترمیکس PCR یکتاتجهیز آزما حاوی آنزیم Taq DNA polymerase میباشد که برای استفاده کاربر مقرون بصرفه بوده ، در مقابل مسترمیکس سوپر PCR حاوی دو آنزیم Taq DNA polymerase و Pfu و همچنین مسترمیکس Pfu شامل فقط آنزیم Pfu میباشد که کاربر بر اساس هدف آزمایش میتواند یکی از این سه نوع مسترمیکس را انتخاب کند.

بزرگنمایی تصویر