آنزیم DNase I

آنزیم DNase I

آنزیم DNase I یک آنزیم دی‌ان‌آز است که به‌طور خاص مسئول تجزیه و هیدرولیز DNA است.

DNase I در بسیاری از فرآیندهای بیولوژیکی نظیر تنظیم بیان ژن، تکثیر سلولی، و پاسخ ایمنی نقش دارد.

آنزیم dnase در پژوهش‌های مولکولی برای حذف DNA از نمونه‌ها استفاده می‌شود، به‌ویژه زمانی که می‌خواهند از آلودگی DNA در تجزیه و تحلیل‌های پروتئینی یا RNA جلوگیری کنند. DNase I به‌طور خاص در حضور یون‌های کلسیم (Ca²⁺) یا منیزیم (Mg²⁺) فعال می‌شود و در این شرایط به‌طور مؤثری می‌تواند DNA را تجزیه کند.

آنزیم DNase I یا دئوکسی ریبونوکلئاز ، یک اندونوکلئاز DNA است که با اتصال به اتصالات فسفودی استر ، DNA را برش می دهد و قطعات الیگو نوکلئوتیدی با گروه فسفات در انتهای ‘5 و گروه هیدروکسیل در انتهای ‘3 ایجاد می کند.

کاربرد:

• حذف آلودگی DNA در استخراج RNA
• حذف DNA از نمونه های پروتئین
• در مواردی که حذف DNA ضروری است

یکی از پرسش‌های پرتکرار شما:

_چرا DNase I به‌صورت محلول ارائه نمی‌شود؟

*آنزیم DNase I فوق العاده حساس است.

در حالت محلول، فعالیت آنزیم به‌سرعت کاهش می‌یابد و پایداری آن کم می‌شود.

*احتمال آلودگی در محلول بسیار بالاست.
محلول‌ کردن آنزیم ریسک ورود DNA یا RNase را افزایش می‌دهد و کنترل دقیق فعالیت آن را دشوار می‌کند.

*وابستگی شدید به نوع بافر و یون‌ها.
هیچ بافر واحدی برای تمام کاربردها (PCR Cleanup، RNA Prep، Plasmid Prep و …) مناسب نیست.
به‌همین دلیل، پژوهشگر باید خودِ آنزیم را مطابق نیازش در بافر دلخواه حل کند.

*کنترل کیفیت دقیق‌تر در فرم لیوفیلیزه.
تست‌های QC روی DNase I پودری، قابل‌اعتمادتر، تکرارپذیرتر و استانداردتر است.